اثر نانوذرات لسیتین سویا در رقیق‌کننده بر ماندگاری اسپرم قوچ در شرایط سرد

نوع مقاله : مقاله کامل

نویسندگان

1 دانشکده کشاورزی، دانشگاه لرستان، خرم آباد، ایران

2 گروه علوم دامی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه لرستان، خرم آباد، ایران

چکیده

از آنجاکه نگهداری اسپرم قوچ در شرایط سرد از راندمان کافی برخوردار نیست، لذا هدف از این پژوهش، بررسی اثر نانو‌ذرات لسیتین سویا در رقیق‌کننده اسپرم قوچ در شرایط سرد بود. بر این اساس، از سه رأس قوچ بالغ لری بختیاری با استفاده از واژن مصنوعی، دوبار در هر هفته اسپرم‌گیری شد. بعد از ارزیابی اولیه، نمونه‌های منی با هم مخلوط شده و به هفت قسمت مساوی تقسیم شدند و با تیمارهای مختلف، رقیق شدند. تیمارها شامل رقیق‌کننده حاوی سطوح مختلف نانو-ذرات لسیتین سویا (نیم، یک، یک‌و‌نیم، دو، دو‌و‌نیم و سه درصد (وزن/حجم) و زرده تخم‌مرغ بودند. سپس نمونه‌ها در یخچال نگهداری شدند و در زمان‌های سه، شش، 24، 48 و 72 ساعت، از لحاظ درصد جنبایی کل و پیش‌رونده، زنده‌مانی اسپرم، فعال بودن غشای اسپرم، ریخت‌شناسی و نرخ قطعه قطعه شدن DNA ارزیابی شدند. نتایج نشان داد که رقیق‌کننده حاوی 5/1% نانو‌ذرات لسیتین، پس از 72 ساعت نگهداری در دمای سرد، دارای بیشترین درصد اسپرم با جنبایی کل و پیش‌رونده بود. درصد زنده‌مانی اسپرم در رقیق‌کننده حاوی سه درصد لسیتین سویا نسبت به سایر تیمارها، کمترین مقدار را داشت (05/0>P). رقیق‌کننده‌ها از لحاظ درصد اسپرم با غشای فعال و ریخت‌شناسی تفاوت معنی‌داری با هم نداشتند. نرخ قطعه قطعه شدن DNA در تیمارهای نیم و سه درصد نانو‌ذرات لسیتین نسبت به سایر تیمارها، به طور معنی‌داری بیشتر بود. در کل، رقیق‌کننده دارای
5/1% نانو‌ذرات لسیتین سویا در قوچ لری بختیاری، می‌تواند جایگزین مناسبی برای زرده تخم‌مرغ در حفظ کیفیت اسپرم در شرایط سرد باشد.

کلیدواژه‌ها


عنوان مقاله [English]

The effect of soy lecithin nano particles in extender on durability of ram sperm in cool conditions

نویسندگان [English]

  • L. Afzali Chegeni 1
  • S. M. Mousavi 2
  • M. Khaldari 2
  • S. Mohammadzadeh 2
1 Department of Animal Science, Faculty of Agriculture, Lorestan University, Khorramabad, Iran
2 Department of Animal Science, Faculty of Agriculture, Lorestan University, Khorramabad, Iran
چکیده [English]

Since preserve ram sperm in cold condition has not sufficient efficiency, the objective of the present study was to assess the effect of different levels (0.5, 1, 1.5, 2, 2.5 and 3%) of soy lecithin nano particles and egg yolk in extender on ram sperm quality during storage cool conditions. Semen samples were collected from three Lori Bakhtiari rams using artificial vagina. Afterward, ejaculates were pooled and then divided into seven aliquots. Aliquots were diluted with extenders and stored at 5°C for 72 hours. Total and progressive motility, sperm viability, plasma membrane functionality (HOS), morphology and DNA fragmentation were evaluated at 0, 3, 6, 24, 48 and 72 hours after starting the experiment. The results showed that the extender containing 1.5% nano-lecithin had the highest percentage of total and progressive motility of sperm after 72 hours of storage at cold conditions. The extender containing 3% nano-lecithin had the lowest viable sperm compared to other treatments (p ≤ 0.05). There was no significant difference between all of the extenders for plasma membrane functionality and morphology parameters. DNA fragmentation rate was bigger in treatments containing 0.5 and 3% lecithin nano particles than other treatments. In general, it seems that extender containing 1.5% nano-lecithin can be an appropriate substitute for semen extenders containing egg yolk to store ram sperm in cool conditions.

کلیدواژه‌ها [English]

  • Extender
  • Cold conditions
  • Ram
  • Sperm
1. Aires, V. A., K.-D. Hinsch, F. Mueller-Schloesser, K. Bogner, S. Mueller-Schloesser and E. Hinsch. 2003. In vitro and in vivo comparison of egg yolk-based and soybean lecithin-based extenders for cryopreservation of bovine semen. Theriogenology 60: 269-279.
2.Allai, L., X. Druart, M. Öztürk, A. BenMoula, B. Nasser and B. El Amiri. 2016. Protective effects of Opuntia ficus-indica extract on ram sperm quality, lipid peroxidation and DNA fragmentation during liquid storage. Animal reproduction science 175: 1-9.
3.Baumber, J., B. A. Ball, C. G. Gravance, V. Medina and M. C. Davies‐Morel. 2000. The effect of reactive oxygen species on equine sperm motility, viability, acrosomal integrity, mitochondrial membrane potential, and membrane lipid peroxidation. Journal of andrology 21: 895-902.
4.Bilodeau, J. F., S. Chatterjee, M. A. Sirard and C. Gagnon. 2000. Levels of antioxidant defenses are decreased in bovine spermatozoa after a cycle of freezing and thawing. Molecular reproduction and development 55: 282-288.
5.Bucak, M. N., S. Sarıözkan, P. B. Tuncer, P. A. Ulutaş and H. İ. Akçadağ. 2009. Effect of antioxidants on microscopic semen parameters, lipid peroxidation and antioxidant activities in Angora goat semen following cryopreservation. Small ruminant research 81: 90-95.
6.Chelucci, S., V. Pasciu, S. Succu, D. Addis, G. G. Leoni, M. E. Manca, S. Naitana and F. Berlinguer. 2015. Soybean lecithin–based extender preserves spermatozoa membrane integrity and fertilizing potential during goat semen cryopreservation. Theriogenology 83: 1064-1074.
7.Del Valle, I., A. Gomez-Duran, W. Holt, T. Muino-Blanco and J. Cebrian-Perez. 2012. Soy Lecithin Interferes With Mitochondrial Function in Frozen-Thawed Ram Spermatozoa. Journal of andrology 33: 717.
8.Emamverdi, M., M. Zhandi, A. Zare Shahneh, M. Sharafi and A. Akbari‐Sharif. 2013. Optimization of Ram semen cryopreservation using a chemically defined soybean lecithin‐based extender. Reproduction in Domestic Animals 48: 899-904.
9.Evenson, D. and L. Jost. 2000. Sperm chromatin structure assay is useful for fertility assessment. Methods in Cell Science 22: 169-189.
10.Falchi, L., G. Galleri, M. Zedda, S. Pau, L. Bogliolo, F. Ariu and S. Ledda. 2018. Liquid storage of ram semen for 96 hours: effects on kinematic parameters, membranes and DNA integrity, and ROS production. Livestock science 207:1-6.
11.Forouzanfar, M., M. Sharafi, S. Hosseini, S. Ostadhosseini, M. Hajian, L. Hosseini, P. Abedi, N. Nili, H. Rahmani and M. Nasr-Esfahani. 2010. In vitro comparison of egg yolk–based and soybean lecithin–based extenders for cryopreservation of ram semen. Theriogenology 73: 480-487.
12.Hammerstedt, R. H., J. K. Graham and J. P. Nolan. 1990. Cryopreservation of mammalian sperm: what we ask them to survive. Journal of andrology 11: 73-88.
13.Holt, W. and R. North. 1994. Effects of temperature and restoration of osmotic equilibrium during thawing on the induction of plasma membrane damage in cryopreserved ram spermatozoa. Biology of Reproduction 51:414-424.
14.Kasimanickam, R., V. Kasimanickam, A. Tibary and K. Pelzer. 2011. Effect of semen extenders on sperm parameters of ram semen during liquid storage at 4 C. Small ruminant research 99: 208-213.
15.Manteghi, M., M. Mamouei, V. S. Tabatabaei, J. Fayazi and K. Mirzadeh. 2016. Evaluation the effect of soybean lecithin in tris extender on spermatozoa quality and viability of ram. Journal Of Animal Production 18: 367-375.
16.Martin, G., O. Sabido, P. Durand and R. Levy. 2004. Cryopreservation induces an apoptosis-like mechanism in bull sperm. Biology of Reproduction 71: 28-37.
17.Moussa, M., V. Martinet, A. Trimeche, D. Tainturier and M. Anton. 2002. Low density lipoproteins extracted from hen egg yolk by an easy method: cryoprotective effect on frozen–thawed bull semen. Theriogenology 57: 1695-1706.
18.Mozafari, M., A. Pardakhty, S. Azarmi, J. Jazayeri, A. Nokhodchi and A. Omri. 2009. Role of nanocarrier systems in cancer nanotherapy. Journal of liposome research 19: 310-321.
19.Muiño‐Blanco, T., R. Pérez‐Pé and J. Cebrián‐Pérez. 2008. Seminal plasma proteins and sperm resistance to stress. Reproduction in domestic animals 43: 18-31.
20.Oke, M., J. K. Jacob and G. Paliyath. 2010. Effect of soy lecithin in enhancing fruit juice/sauce quality. Food research international 43: 232-240.
21.Overton, M. 2005. Cost comparison of natural service sires and artificial insemination for dairy cattle reproductive management. Theriogenology 64: 589-602.
22.Saacke, R. 2008. Sperm morphology: Its relevance to compensable and uncompensable traits in semen. Theriogenology 70: 473-478.
23.Salmani, H., A. Towhidi, M. Zhandi, M. Bahreini and M. Sharafi. 2014. In vitro assessment of soybean lecithin and egg yolk based diluents for cryopreservation of goat semen. Cryobiology 68: 276-280.
24.Sharafi, M., S. Eghbalsaied, N. Nili and M. Nasr-Esfahani. 2009. Ram semen in vitro fertility after cryopreservation using soybean lecithin and egg yolk based extenders. Reproduction In Domestic Animals 44: 90-90.
25.Zhang, S., J. Hu, Q. Li, Z. Jiang and X. Zhang. 2009. The cryoprotective effects of soybean lecithin on boar spermatozoa quality. African Journal of Biotechnology 8: 6476-6480.