南方医科大学学报 ›› 2023, Vol. 43 ›› Issue (7): 1102-1109.doi: 10.12122/j.issn.1673-4254.2023.07.06
傅鸣宇,纪晓宏,钟 磊,吴 琼,李海福,王宁黔
FU Mingyu, JI Xiaohong, ZHONG Lei, WU Qiong, LI Haifu, WANG Ningqian
摘要: 目的 通过免疫组化和电生理记录来探讨大鼠小脑浦肯野神经元发育过程中电压门控钠通道亚基的表达差异特性及其与电生理特性发育成熟的相关关系。方法 将大鼠根据发育阶段分为4组:出生后5~7 d(婴幼儿组)、12~14 d(幼年组)、21~24 d(青少年组)、42~60 d(成年组)。运用免疫组化染色方法检测NaV1.1、1.2、1.3、1.6在浦肯野神经元发育过程中的表达变化,并分析不同年龄段的平均光密度值量化发育过程中各亚基的差异变化特性。同时,运用离体脑片全细胞膜片钳技术记录自发性电活动研究发育过程中浦肯野神经元电生理基本特性变化。结果 NaV各亚基在大鼠浦肯野神经元发育过程中表达差异明显。NaV1.1亚基在整个发育阶段呈高表达,且随发育时间增加而增加(P<0.05)。NaV1.2在整个发育阶段无表达(P>0.05)。NaV1.3随发育表达量降低(P<0.05),青少年期后无表达。NaV1.6婴幼年期无表达,随发育时间增加,表达量增多(P<0.05)。神经元发育早期主要表达NaV1.1和 NaV1.3,而随发育增加,NaV1.3消失,NaV1.6增加。青少年期后主要表达NaV1.1和NaV1.6。NaV蛋白总量随发育逐渐增加(P<0.05),青少年期后趋于成熟。浦肯野神经元自发放频率和兴奋性随发育逐渐增强,到青少年期达到成熟水平。NaV亚基的发育表达变化与放电频率呈正相关(r=0.9942,P<0.05),与阈值变化呈负相关(r=-0.9891,P<0.05)。结论 NaV亚基在浦肯野神经元表达发育变化与神经元高频电生理特性的发育成熟具有相关性,提示NaV亚基的表达成熟是电生理特性不断成熟的基础。