【目的】抗真菌剤の開発が求められていることから，我々は真菌由来の新規骨格を有する抗真菌性物質を探索している。今回，Eupenicillium shearii IFM54447の新規代謝産物としてユニークな構造を持つeushearilide (1)を単離し，その化学構造，抗真菌活性，また作用機序の一部を明らかにしたので報告する。【方法および結果】E. shearii IFM54447を米培地 450 g（米150 g 入りルー瓶 3 本）で25 ℃，21日間培養した後，CHCl₃-MeOH (1:1) の混合溶媒で抽出した後，酢酸エチル-水で液液分配を行い，酢酸エチル抽出エキス15 g を得た。本抽出物をシリカゲルクロマトグラフィーおよび逆相HPLCによる分離精製を繰り返すことで，eushearilide (8 mg) を得た。positive FAB-MS (C₂₉H₅₄NO₆P)，¹H, ¹³C, ³¹P-NMRおよび各種二次元NMRスペクトルから, (1)の構造を24員環エステルとコリンリン酸エステルであることを明らかにした。(1)はCandida, Cryptococcus, Aspergillus, Trichophyton spp. など多くの病原真菌に有効であった。また(1)は，ミトコンドリアの強烈な膨潤を誘起し，電子伝達酵素の阻害によるミトコンドリア毒性を示し，阻害部位は，阻害剤が珍しいComplex IVと考えられた。