食品科学 ›› 2017, Vol. 38 ›› Issue (6): 1-5.doi: 10.7506/spkx1002-6630-201706001
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刘晓华,李慧美,柯颖笑,张凯强,李响敏,李 欣,付金衡,李海星
LIU Xiaohua, LI Huimei, KE Yingxiao, ZHANG Kaiqiang, LI Xiangmin, LI Xin, FU Jinheng, LI Haixing
摘要: 以从黄牛瘤胃中分离到的一株具有将亚油酸转化为c9,t11-共轭亚油酸(conjugated linoleic acid,CLA)的干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)Fx为出发菌株,提取其基因组DNA,聚合酶链式反应(polymerase chainreaction,PCR)扩增得到1 700 bp大小的亚油酸异构酶(linoleic acid isomerase,LAI)基因片段,将该基因片段纯化后进行TA克隆,得到重组质粒pUCm-T-LAI,将重组质粒pUCm-T-LAI和表达质粒pET-DsbA同时进行双酶切,连接得到重组表达载体pET-DsbA-LAI,经PCR鉴定和酶切后,将重组表达载体转化到大肠杆菌BL21中,得到具有LAI活性的重组菌株,能将亚油酸转化为c9,t11-CLA,表明从Lactobacillus casei Fx成功克隆LAI,该研究将有助于深入了解不同瘤胃细菌特异性合成不同CLA异构体的LAI基因差异。
中图分类号: