Ложноположительные результаты определения бактериальных эндотоксинов в лекарственных средствах: применение блокатора β-глюканов

Скачать статью в PDF
DOI: https://doi.org/10.29296/25419218-2020-01-01
Номер журнала: 
1
Год издания: 
2020

О.В. Шаповалова, Н.П. Неугодова, Г.А. Сапожникова Научный центр экспертизы средств медицинского применения МЗ РФ, Российская Федерация, 127051, Москва, Петровский бульвар, д. 8, стр. 2

Введение. При оценке качества лекарственных средств (ЛС) по показателю «Бактериальные эндотоксины» в ферментативную реакцию с лизатом амебоцитов наряду с бактериальными эндотоксинами вступают и β-глюканы. Это приводит к получению ложноположительных результатов в ЛАЛ-тесте (Limulus amebocyte lysate), что создает серьезную проблему для определения пирогенных примесей. Выделяют 2 основных источника происхождения β-глюканов в лекарственных препаратах: наличие вспомогательных веществ в составе препарата (например, кармеллоза натрия, кроскарбоксиметилцеллюлоза натрия) и технологические примеси действующего вещества на стадии получения ЛС. Цель исследования – изучение потенцирующего (усиливающего) влияния β-глюканов в испытаниях на наличие бактериальных эндотоксинов, поиск и выбор способа его устранения. Материал и методы. Объекты исследования – лекарственные препараты «Бетаметазон, суспензия для инъекций 7 мг/мл» и «Инозин, раствор для внутривенного введения 20 мг/мл». Для проведения ЛАЛ-теста в модификациях гель-тромб и хромогенный кинетический использовали эндотоксин-специфичный буфер (блокатор β-глюканов). Результаты. Рассмотрены основные причины возникновения «ложных» результатов: потенцирование (усиление) реакции ЛАЛ-реактива с бактериальными эндотоксинами из-за наличия β-глюканов в препаратах. Разработаны методики по устранению факторов, мешающих проведению ЛАЛ-теста, во избежание получения ложноположительных результатов. Заключение. Разработаны методические подходы к предотвращению влияния потенцирующего (усиливающего) мешающего фактора на результаты ЛАЛ-теста.
Ключевые слова: 
бактериальные эндотоксины
мешающие факторы
ложноположительные результаты
β-глюканы
Для цитирования: 
Шаповалова О.В., Неугодова Н.П., Сапожникова Г.А. Ложноположительные результаты определения бактериальных эндотоксинов в лекарственных средствах: применение блокатора β-глюканов . Фармация, 2020; 69 (1): 5-9https://doi.org/10.29296/25419218-2020-01-01
Список литературы: 
  1. Bohn J.A., BeMille J.N. (1–>3)-β-d-Glucans as biological response modifiers: a review of structure-functional activity relationships. Carbohydrate Polymers, 1995; 28(1): 3–14.
  2. FinkelmanM.(1,3)-ß-D-Glucan: Biological Properties and Implications for LAL Testing LAL UPDATE, 2005; 22 (2): 1 – 6.
  3. Sandle T. Pharmaceutical product impurities: considering beta glucans. [Electronic resource] Access mode: http://www.americanpharmaceuticalreview.com/Featured-Articles/152953-Pharmaceutical-Product-Impurities-Considering-Beta-Glucans/
  4. Williams K. Endotoxins Pyrogens, LAL Testing and Depyrogenation third Edition (Drugs and the Pharmaceutical Sciences), 2007: 198.
  5. Barton C., Vigor K., Scott R., Jones P.,Lentfer H., Bax H., Josephs D., Karagiannis S., Spicer J.Beta-glucan contamination of pharmaceutical products: How much should we accept? [Electronic resource] Access mode:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5069311/#
  6. Жилякова Е.Т., Попов Н.Н., Новикова М.Ю., Новиков О.О., Халикова М.А., Казакова В.С. Изучение физико-химических и технологических характеристик натрий карбоксиметилцеллюлозы с целью создания пролонгированных лекарственных форм с жидкой дисперсионной средой. [Электронный ресурс]. Режим доступа: http:// dspace.bsu.edu.ru/bitstream/123456789/12393/1/Zhilyakova_Izuchen_Fiziko.pdf. / [Zhilyakova E.T., Popov N.N., Novikova M.Yu., Novikov O.O., Khalikova M.A., Kazakova V.S. Study of physico-chemical and technological characteristics of sodium carboxymethylcellulose in order to create prolonged dosage forms with liquid dispersion medium. [Electronic resource] Access mode: http://dspace.bsu.edu.ru/bitstream/123456789/12393/1/Zhilyakova_Izuchen_Fiziko.pdf. / (in Russian).]
  7. Белясова Н.А. Микробиология. Минск: Высшая школа, 2012: 246. [Belyasova N. Microbiology. Minsk: Enter. SHK., 2012: 246 (in Russian)].
  8. Dobrovolskaia M. A., Neil S. Handbook of Immunological Properties of Engineered Nanomaterials. Vol. 1, 2013: 86 – 87.
  9. Государственная фармакопея Российской Федерации XIII изд., 2015: 956 – 973. [State Pharmacopoeia of the Russian Federation XIII ed., 2015: 956–73 (in Russian)].