Zur Isolierung und Kultur insektenpathogener Entomophthoraceen

Zusammenfassung

Massenvermehrungen wirtschaftlich wichtiger Schadinsekten können durch Pilze aus der Familie der Entomophthoraceen in wenigen Tagen zusammenbrechen. Ihre Isolierung und Kultur bereitet oft Schwierigkeiten. Hier wird als einfache und erfolgreiche Methode die Isolierung mittels Hühnerei-Dotter, der bei 80°C 40–50 Min. im Heissluftsterilisator (Trockenschrank) in schräg liegenden Röhrchen koaguliert wurde, empfohlen. Die Technik der Isolierung — ausgehend von Konidien—wird beschrieben. Der koagulierte Dotter eignet sich ebenso für die laufende Kultur von Entomophthoraceen-Stämmen. Weiterimpfungen der bei Zimmertemperatur gehaltenen Kulturen müssen alle 3–4 Wochen vorgenommen werden. Will man gelegentlich seltener weiterimpfen, können die Stämme in Kultur-Röhrchen gehalten werden, die 3–4 cm hoch Vollmilch enthalten und dreimal bei 100°C 20 Min. oder einmal bei 110°C 15 Min. sterilisiert wurden. Die Entomophthoraceen wachsen hier vor allem in dem oben abgeschiedenen Milchfett. Solche Kulturen waren noch nach 1 1/2 Monaten, bei manchen Arten auch noch nach 4 Monaten lebensfähig. Für die Kultivierung eigneten sich auch Milch-Agar, Milch-Hafermehl-Agar, Fleischextrakt-Pepton-Dotter-Agar und manchmal Kartoffelkeile, wenn das Wachstum auf ihnen allen auch nicht so gut war wie auf koaguliertem Dotter. Nährböden, die mit 25 I.E. Penicillin und 50 Gamma Streptomycin/l ccm zubereitet waren, hemmten den Wuchs vonEmpusa aulicae Reich. und einer vonAphis fabae scop. isoliertenEmpusa sp. nicht. — Isolierung und Kultur insektenpathogener Entomophthoraceen erscheinen für Versuche zur biologischen Bekämpfung ebenso nötig wie zur Klärung taxonomischer und biologischer Fragen.

Summary

An outbreak of an insect pest may be controlled in a few days by fungi of the familyEntomophthoraceae. Isolation and culture of such fungi is often difficult. A simple and successful method is herein recommended, utilizing a substrate of hen's egg yolk previously coagulated 40–50 minutes at 80°C in a hot air oven. The medium is prepared in tubes in a slanted position. The culture technique, starting with conidia is described. Coagulated yolk is also a suitable medium for successive transfer and maintenance ofEntomophthoraceae cultures. Stock cultures maintained at room temperature must be transferred once every three or four weeks.

If desirable, subcultures ofEntomophthoraceae fungi may be held in test tubes at greater intervals. For this purpose tubes are filled with whole milk 3–4 cm in depth and sterilized at 100°C three times or autoclaved at 110°C for 15 minutes. The fungi grow essentially in the top layer of milk fat. Such cultures live up to 1 1/2 months, some species survive 4 months. Milk agar, milk oatmeal agar, beef extract pepton yolk agar, and potato pieces are also suitable for cultivation. The growth on such substrates is not as good as on the coagulated yolk.

Media with 25 international units of penicillin and 50 gamma of streptomycin per ml did not influence the growth ofEmpusa aulicae Reich. and oneEmpusa sp. isolated fromAphis fabae scop. Isolation and cultivation of entomophagousEntomophthoraceae are considered to be as important for experiments in biological control as for studies on taxonomy and biology of distinct species.