Analyse von Lebensmitteln und Futtermitteln über Partialsequenzen charakteristischer Proteinkomponenten (Leitpeptide)

Summary

Gliadins from wheat flour were extracted with 70% aqueous ethanol and hydrolyzed withα-chymotrypsin. Eight peptides, which seemed adequate as specific indicators for wheat (‚Leitpeptide‘), were isolated from the partial hydrolysate by RP-HPLC and analyzed for their amino acid sequences. Six of them were attributed to gliadin sequences already described in the literature, whereas two peptides represented novel sequence variations. Parallel investigations on the corresponding partial hydrolysates of prolamins from rye, barley, oats and maize showed that the isolated peptides were specific for wheat. A search in the protein data bank MIPS X (as of January 23 rd, 1990) did not produce any identical sequence. The ‚Leitpeptide‘ allows the sensitive and specific recognition of wheat in complex and heated systems by RP-HPLC. They could be used also as the basis for immunochemical tests which would be convenient in routine analysis.

Zusammenfassung

Die aus Weizenmehl durch Extraktion mit 70%igem wäßrigen Ethanol isolierten Gliadine wurden mitα-Chymotrypsin hydrolysiert. Aus dem Partialhydrolysat wurden mit Hilfe der RP-HPLC acht Peptide isoliert und sequenziert, die als „Leitpeptide“ für Weizen geeignet erschienen. Sechs Peptide konnten Gliadinsequenzen der Literatur zugeordnet werden, während zwei Peptide noch nicht beschriebene Sequenzvarianten repräsentieren. Durch parallele Untersuchungen an entsprechenden Partialhydrolysaten von Prolaminen aus Roggen, Gerste, Hafer und Mais wurde sichergestellt, daß die Peptide spezifisch für Weizen sind. Eine Recherche in der Proteinsequenzdatenbank MIPS X (Stand 23.1. 1990) ergab für alle gespeicherten Proteine keine identischen Sequenzen. Über die Leitpeptide ist mit Hilfe der RP-HPLC ein spezifischer Nachweis von Weizen auch in komplex zusammengesetzten und erhitzten Systemen möglich. Für die Routineanalytik bietet sich die Entwicklung eines immunchemischen Nachweises auf der Basis der beschriebenen Peptide an.