Zusammenfassung
Durch die Megaprime-PCR lassen sich überlappende DNA-Fragmente mit einer jeweiligen Größe von bis zu 1000 bp „ligieren“ (Barik und Galinsky 1991). Die denaturierten DNA-Einzelstränge dienen dabei als Oligonucleotide und binden die komplementäre Sequenz des Überlappungspartners. Die Megaprime-PCR wird auch als Zwischenstufe bei der RACE-PCR (Kap. 12) oder bei der Herstellung von PCR-Mutanten eingesetzt (Smith und Klugmann 1997). Weiterhin lassen sich hiermit einzelne Nucleotide zur Mutationsanalyse austauschen.
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Literatur
Barik, Galinsky (1997) “Mega-primer” method of PCR: increased template concentration improves yield. Biotechniques 10:489–490
Smith, Klugmann (1997) Methods Mol Biol 67:173
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Müller, HJ., Prange, D.R. (2016). Megaprime-PCR. In: PCR - Polymerase-Kettenreaktion. Springer Spektrum, Berlin, Heidelberg. https://doi.org/10.1007/978-3-662-48236-0_10
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