Efficiency of ampicillin and benomyl at controlling contamination of Annonaceae leaf segments cultured emphasisin vitroemphasis

Fruits 58 (2003) 357-361
DOI: 10.1051/fruits:2003021

Efficiency of ampicillin and benomyl at controlling contamination of Annonaceae leaf segments cultured in vitro

José Raniere Ferreira de Santana^a, Renato Paiva^b, Magdi Ahmed Ibrahim Aloufa^c and Eurico Eduardo Pinto de Lemos^d

^a Departamento de Biologia, Universidade Estadual de Feira de Santana (Bahia), av. Universitária, campus universitário, 44031-460, Feira de Santana - BA, Brazil
^b Departamento de Biologia, Universidade Federal de Lavras (Minas Gerais), CP 37, 37.37200-000, Lavras-MG, Brazil
^c Departamento de Botânica, Ecologia e Zoologia, Universidade Federal do Rio Grande do Norte, av. Senador Salgado Filho, campus universitário, 59072-970 Natal-RN, Brazil
^d Centro de Ciências Agrárias, Universidade Federal de Alagoas, Brazil

Abstract
Introduction. For the micropropagation of woody species, contamination of in vitro cultured explants is a constant problem, which can compromise the development of the technique. The aim of our study was to evaluate the effects of an antibiotic and a fungicide on surface and endophytic microorganisms associated with Annona cauliflora, A. bahiensis and A. glabra (Annonaceae) tissue culture. Materials and methods. Our work made it possible to compare a standard disinfection of in vitro cultured explants and the use of either a commercial fungicide, Benlate 500 (50% of benomyl) at (0.0, 1.0, 2.0 and 4.0) ${\rm g} \cdot {\rm L}^$ , or an antibiotic, ampicillin at (0.0, 1.0, 2.0 and 4.0) ${\rm mg} \cdot {\rm L}^$ . Results. The study revealed considerable variations in the infection rates within species and according to the concentrations of benomyl and ampicillin used. Benomyl was effective at cleaning leaf segments, and, at a concentration of 1.0 ${\rm g} \cdot {\rm L}^$ , this fungicide was sufficient to eliminate all fungi. Ampicillin treatments at (0.0 to 4.0) ${\rm mg} \cdot {\rm L}^$ were ineffective at controlling bacterial contamination. Conclusion. Referring to the difficulty in obtaining an aseptic in vitro culture starting from a woody species, the average number of healthy explants obtained after the disinfection of foliar explants of Annona sp. using the antimicrobial substances tested was significant. Further studies to evaluate the effects of the concentration of chemicals on in vitro plant regeneration for Annona species are needed to clarify the relationship between the concentration and phytotoxic effect of chemicals.

Résumé
Introduction. Pour la micropropagation d'espèces ligneuses, l'état sanitaire des explants cultivés in vitro est un problème récurrent qui peut compromettre le développement de la technique. Le but de notre étude a été d'évaluer les effets d'un antibiotique et d'un fongicide sur les micro-organismes de surface ou endophytes, associés à la culture de tissus de Annona cauliflora, A. bahiensis et A. glabra. Matériel et méthodes. Nos travaux ont permis de comparer une désinfection standard des tissus mis en culture et l'utilisation soit d'un fongicide commercial, le Benlate 500 (50 % de bénomyl) à (0,0, 1,0, 2,0 et 4,0) ${\rm g} \cdot {\rm L}^$ , soit d'un antibiotique, l'ampicilline à (0,0, 1,0, 2,0 et 4,0) ${\rm mg} \cdot {\rm L}^$ . Résultats. L'étude a révélé de fortes variations des taux d'infection en fonction des espèces mises en culture et des concentrations de bénomyl et d'ampicilline utilisées. Le bénomyl a été efficace pour aseptiser les explants de feuille, et, à une concentration de 1,0 ${\rm g} \cdot {\rm L}^$ , ce fongicide a été suffisant pour éliminer tous les champignons. Les traitements à l'ampicilline (0,0 à 4,0) ${\rm mg} \cdot {\rm L}^$ ont été inefficaces pour contrôler les contaminations bactériennes. Conclusion. Si l'on se réfère à la difficulté d'obtenir une culture in vitro aseptique à partir d'une espèce ligneuse, le nombre moyen d'explants sains obtenus après la désinfection des explants foliaires d'Annona sp. à l'aide des substances antimicrobiennes testées a été significatif. D'autres études seront nécessaires pour évaluer les effets de la concentration des produits chimiques sur la régénération in vitro de plants du genre Annona afin de clarifier le rapport entre la concentration et l'effet phytotoxique des produits chimiques.

Key words: Brazil / Annonaceae / plant propagation / in vitro culture / disinfection / fungicides / antibiotics

Mots clés : Brésil / Annonaceae / multiplication des plantes / culture in vitro / désinfection des tissus / fongicide / antibiotique

Correspondence and reprints: José Raniere Ferreira de Santana raniere@uefs.br

© CIRAD, EDP Sciences 2003

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