Intérêt diagnostique des allergènes recombinants

Résumé

Les techniques de génie génétique appliquées aux allergènes ont permis de produire des allergènes recombinants. La validation des allergènes recombinants implique que leur activité immunologique et leur identité avec l'allergène naturel soient confirmées par des techniques in vitro et in vivo portant sur un nombre suffisamment important de sujets allergiques. Les résultats actuellement disponibles pour les principaux pneumallergènes sont ici rapportés. Ainsi, pour le bouleau, la validité de l'allergène recombinant Bet v 1 a été confirmée par des tests in vitro, mais également par des tests cutanés et des tests de provocation nasale et bronchique. L'association de quatre allergènes recombinants de la phléole a permis la détection in vitro d'une sensibilisation aux pollens de graminées chez 94,5 p. cent de patients. Pour les acariens, la validité des allergènes recombinants du groupe 2 a été confirmée. Des systèmes d'expression permettant la glycosylation des protéines recombinantes ont été nécessaires pour valider les protéines recombinantes des allergènes du groupe I. L'allergène recombinant Blo t 5 a été testé in vitro et in vivo, il s'est avéré efficace dans la détection de la sensibilisation à Blomia tropicalis, allergène domestique des pays subtropicaux. Seul l'allergène recombinant Bla g 4 a été testé in vitro et in vivo, les réactions étant positives chez près de 50 p. cent des sujets sensibilisés à la blatte. Le recombinant Asp f 1 a été testé chez les sujets atteints d'aspergillose bronchopulmonaire allergique, il est positif dans 60 à 85 p. cent des cas. Des études sont également disponibles pour les allergènes recombinants de la phospholipase A2, allergène majeur du venin d'abeille. Les conséquences de la mise au point d'allergènes recombinants sont ensuite analysées : obtention d'allergènes mieux standardisés pour les tests diagnostiques, étude du spectre des spécificités des IgE induites par un allergène, quantification des IgE spécifiques, meilleure approche des allergies croisées à l'aide d'allergènes recombinants des principaux allergènes croisants. L'application des allergènes recombinants à la recherche fondamentale a conduit à la production d'allergènes recombinants modifiés : synthèse de polypeptides recombinants correspondant aux épitopes T, production d'allergènes recombinants d'isoformes à activité allergénique réduite, production d'allergènes recombinants de molécules allergéniques modifiées par des mutations dirigées. L'utilisation de ces allergènes recombinants modifiés est une des voies de recherche pouvant conduire, dans le futur, à de nouvelles modalités de la désensibilisation spécifique. D'autres voies sont également en cours d'investigation : inhibition des réaction antigènes-anticorps par l'utilisation de molécules recombinantes de Fab-bloquants, de molécules recombinantes d'haptènes immunodominants.

Summary

Genetic engineering techniques applied to allergens have allowed the production of recombinant allergens. Validation of recombinant allergens demands confirmation of their immunological activity and their identity with natural allergens by in vivo and in vitro techniques on a sufficiently large number of allergic subjects. The results currently available for the main respiratory allergens ar reported. For example, the validity of the birch recombinant allergen Bet v 1 was confirmed by in vitro tests, but also by skin tests and nasal and bronchial challenge tests. The combination of four recombinant allergens of timothy allowed the in vitro detection of sensitization to Graminaceae pollens in 94.5% of patients. The validity of group 2 recombinant allergens has been confirmed for house dust mites. Systems of expression allowing glycosylation of recombinant proteins wee necessary to validate group 1 recombinant allergen proteins. Recombinant allergen Blo t 5 has been tested in vitro and in vivo, and was found to be effective in the detection of sensitization to Blomia tropicalis, a domestic allergen in subtropical countries. Only recombinant allergen Bla g 4 has been tested in vitro and in vivo, with positive reactions in almost 50% of subjects sensitized to crockroaches. Recombinant Asp f 1 was tested in subjects suffering from allergic bronchopulmonary aspergillosis, and was positive in 60 to 85% of cases. Studies are also available for recombinant allergens of phospholipase A2, the major allergen of bee venom. The consequences of the development of recombinant allergens are then analysed: better standardized allergens for diagnostic tests, study of the spectrum of specificities of the IgE induced by an allergen, quantification of specific IgE, better approach to cross-allergies using recombinant allergens of the main cross allergens. The application of recombinant allergens to basic research has led to production of modified recombinant allergens: synthetis of recombinant polypeptides corresponding to T epitopes, production of recombinant allergens isoforms with reduced allergenic activity, production of recombinant allergens of allergenic molecules modified by directed mutations. The use of these modified recombinant allergens is one line of research which, in the future, may lead to new modalities of specific desensitization. Other lines of research are also under investigation: inhibition of antigenantibody reactions by the use of recombinant Fab-blocking molecules, and recombinant molecules of immunodominant haptens.