Summary
Eight different aldehydes were tested regarding their use for fixation and following demonstration of glucose-6-phosphatase in cultured chicken heart calls. Since a perfect fixation of structure does not imply a sufficient preservation of enzyme activity and vice versa compromises were necessary. Glutaraldehyde and hydroxyadipaldehyde permit an excellent, methacrolein, glyoxal and acetaldehyde a limited, acrolein, „para“formaldeyhde and crotonaldehyde no demonstration of glucose-6-phosphatase. In the endoplasmic reticulum the nuclear envelope and the dictyosomes of cultured chicken heart cells the optimal pH for cytochemical demonstration ranges between pH 5.8 and 6.2. In the nucleus reaction product was noted only at a pH 6.8.
Zusammenfassung
Acht verschiedene Aldehyde wurden auf ihre Brauchbarkeit als Fixierungsmittel und für den anschließenden Nachweis der Glukose-6-phosphatase bei kultivierten Hühnerherzzellen geprüft. Gute Strukturerhaltung und schonende Enzymerhaltung stimmen nicht überein, so daß Kompromisse notwendig sind. Glutaraldehyd und Hydroxyadipinaldehyd ermöglichen eine gute, Methacrolein, Glyoxal und Acetaldehyd eine nur bedingt brauchbare, Acrolein, „Para“formaldehyd und Crotonaldehyd keine Glukose-6-phosphatase-Darstellung. Das pH-Optimum zum cytochemischen Nachweis dieses Enzyms liegt für das endoplasmatische Retikulum, den perinuklearen Spalt und die Dictyosomen kultivierter Hühnerherzzellen im Bereich pH 5,8 und 6,2. Die Reaktion tritt im Kern ausschließlich bei pH 6,8 auf.
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Herrn Prof. Dr. N. Weissenfels danken wir für beratende Hilfe, Frau H. Gudelius, Frau S. Rost, Frau G. Scheben und Frau B. Zarbock für technische Assistenz.
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Schäfer, D., Hündgen, M. Der Einfluß acht verschiedener Aldehyde und des pH-Wertes auf die Darstellbarkeit der Glukose-6-Phosphatase in kultivierten Zellen. Histochemie 26, 362–369 (1971). https://doi.org/10.1007/BF00277384
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DOI: https://doi.org/10.1007/BF00277384